سلامة زرع الخلايا الجذعية الوسيطة الذاتية المشتقة من نقي العظم وفعاليته الأولية في الترنح المخيخي الوراثي: تجربة سريرية من المرحلة I/IIa

النقاط الرئيسة والنتائج:

في تجربة السلامة الإيرانية الصغيرة هذه، تلقى عشرة أشخاص مصابين بالترنح الوراثي (ثمانية بترنح فريدريش، وواحد بـSCA1، وواحد بـSCA2) كل منهم حقنة واحدة داخل القراب من خلاياه الجذعية الوسيطة المأخوذة من نقي عظمه (BM-MSCs). لم تقع أحداث سلبية خطيرة. كان متوسط درجة الترنح (SARA) أدنى بعد ستة أشهر.

قليلة هي التقارير السريرية الحديثة التي تتناول العلاج الخلوي داخل القراب في الترنح الوراثي، وهذا أحدها. دليلها على الفائدة ضعيف، ويقر المؤلفون بذلك. لم تكن هناك مجموعة ضبط، وأُلغيت مجموعة المقارنة المخطط لها، ودامت المتابعة ستة أشهر. كانت الخلايا خلايا المرضى أنفسهم، ولم تأتِ من متبرع ولا من الحبل السري.

الهدف:

اختبار ما إذا كانت جرعة واحدة داخل القراب من خلايا BM-MSCs الذاتية آمنة في الترنح المخيخي الوراثي، واستكشاف التغيرات في درجة SARA وأضداد GAD-65 وثلاثة سيتوكينات (IL-6 وTNF-alpha وIL-10) في المصل والسائل الدماغي الشوكي (CSF).

الطرق:

كانت الدراسة تجربة من المرحلة I/IIa في مركز واحد، بذراع واحدة، مفتوحة التسمية، في مستشفى Pastoor التابع لجامعة مشهد للعلوم الطبية، إيران (السجل IRCT20160809029275N3).

تضمن البروتوكول المسجل مجموعة مقارنة ومقاييس نتائج إضافية. يفيد المؤلفون بأن حدود التمويل والعقوبات الدولية حالت دون ذلك، ويصفون التغيير بأنه انحراف عن البروتوكول يزيد خطر التحيز.

كان مؤهلًا المرضى من سن 10 إلى 65 عامًا، من الجنسين، بتشخيص مؤكد للترنح المخيخي الوراثي بالتصوير بالرنين المغناطيسي للدماغ والعمود الفقري الرقبي و/أو بالفحص الوراثي، مع ضمور في المخيخ أو جذع الدماغ أو الحبل الشوكي الرقبي. معايير الاستبعاد:

• الحمل
• قصور القلب أو الكلى أو الكبد، أو اضطراب نظم القلب، أو السكري، أو ابيضاض الدم، أو الصرع، أو مرض رئوي، أو مرض الغدة الدرقية
• مرض آخر في الجهاز العصبي المركزي مثل داء باركنسون، أو اضطرابات بنيوية في الدماغ
• بيليروبين كلي يتجاوز 1.5 ضعف الحد الأعلى الطبيعي
• تعاطي الكحول، أو أي علامة على عدوى
• ذهان شديد أو ضعف معرفي يحول دون الموافقة
• أسباب حادة (غير وراثية) للترنح

فُحص أربعة عشر شخصًا، وأُدرج 11، وانسحب واحد قبل العلاج لعدم رضاه عن الترتيبات اللوجستية للدراسة. عولج عشرة، وأكمل العشرة جميعًا المتابعة. كان سبعة منهم ذكورًا. يذكر الجدول 1 أعمارًا من 18 إلى 43 عامًا (المتوسط 32)، ومدة مرض من 2 إلى 13 عامًا، ودرجات SARA أساسية من 2 إلى 22. واصل المرضى رعايتهم المعتادة، دون إعادة تأهيل إضافية.

لتحضير الخلايا، أُخذ نحو 50 مل من نقي العظم من العرف الحرقفي الخلفي تحت تخدير موضعي، وخرج المرضى في اليوم التالي. زُرعت الخلايا وحيدة النواة في وسط يحتوي 10% من مصل الأجنة البقري حتى المرور الثالث، ثم فُحصت لـCD73 وCD90 (إيجابي) وCD34 وCD45 (سلبي)، وللقدرة على تكوين خلايا دهنية وعظمية. اختُبرت الدفعات للعقامة والذيفان الداخلي. كانت الحيوية قبل الحقن من 95% إلى 98%. غُسلت الخلايا ثلاث مرات بمحلول ملحي ونُقلت عند 2 إلى 8 °C. يشير المؤلفون إلى استخدام المصل البقري قيدًا، ويقولون إن الزرع الخالي من المكونات الحيوانية أفضل.

تلقى المرضى جرعة واحدة من 1 × 10⁶ خلية لكل كيلوغرام من وزن الجسم في 2 مل من المحلول الملحي، تُعطى ببزل قطني معتاد عند L3-L4 خلال نحو دقيقتين. راقبهم طبيب مدة 24 إلى 48 ساعة.

سُجلت الأحداث السلبية وCRP وإنزيمات الكبد وSARA وقياسات ELISA في المصل والسائل الدماغي الشوكي قبل العلاج بشهر، ثم عند 1 و3 و6 أشهر. لم يُجرَ تصحيح لتعدد المقارنات الإحصائية.

النتائج:

السلامة:

• لا أحداث سلبية شديدة لدى أي من المرضى العشرة.
• أصيب 3 من 10 بصداع خفيف بعد الحقن، زال خلال 24 ساعة مع 500 ملغ من الباراسيتامول (الأسيتامينوفين).
• أصيب 1 من 10 بحمى خفيفة، زالت أيضًا مع الباراسيتامول.
• لم تتغير CRP وALT وAST تغيرًا ذا دلالة (CRP قبل 2.86 وبعد 2.23 ملغ/لتر، p = 0.84).

SARA: انخفض متوسط المجموعة من 14.9 ± 2.1 قبل العلاج بشهر إلى 10.36 ± 1.94 عند ستة أشهر (p = 0.002)، أي انخفاض بنحو 4.5 نقطة. يشير المؤلفون إلى أن تغيرًا من 3 إلى 4 نقاط يُعد غالبًا ذا معنى سريري. وينبهون إلى أن الدلالة الإحصائية لا تساوي تحسنًا وظيفيًا، وأن مريضًا واحدًا بدأ بدرجة SARA تبلغ 2 فلم يكن لديه مجال يُذكر للتحسن، وأن SARA قد تتغير بالتوقع والتمرين والتقلب اليومي. لم تُحلل نتائج ترنح فريدريش ومريضَي SCA كلٌّ على حدة. متوسط الدرجات الأساسية العشر المطبوعة في الجدول 1 هو 13.5، والنص يذكر 14.9. لا تشرح الورقة هذا الفرق.

أضداد GAD-65: كانت مستوياتها طبيعية طوال الوقت لدى تسعة مرضى. كانت لدى مريض واحد مصاب بترنح فريدريش مستويات عالية جدًا في البداية (المصل 814 وحدة دولية/مل، والسائل الدماغي الشوكي 781 وحدة دولية/مل). بلغت 748 و678 عند شهر واحد، ثم انخفضت إلى المدى الطبيعي عند ثلاثة وستة أشهر (المصل 1.7، والسائل الدماغي الشوكي من 1.3 إلى 1.8). يصف المؤلفون ذلك بأنه ملاحظة لدى مريض واحد لا يمكنها إثبات السبب والنتيجة.

السيتوكينات:

• انخفض IL-6 في المصل من 4.51 إلى 3.25 عند الشهر 3 (p = 0.03)، ثم عاد إلى 4.57 بحلول الشهر 6.
• لم ينخفض IL-6 في السائل الدماغي الشوكي، وكان أعلى قليلًا عند الشهر 6 (4.84 مقابل 4.15، دون دلالة).
• انخفض TNF-alpha في السائل الدماغي الشوكي من 6.35 إلى 3.23 عند الشهر 1 و3.34 عند الشهر 3 (p = 0.002 في الحالتين). لم يتغير TNF-alpha في المصل تغيرًا ذا دلالة.
• ارتفع IL-10 في المصل (المضاد للالتهاب) من 2.87 إلى 6.51 و6.81 و4.63 عند الأشهر 1 و3 و6. لم يتغير IL-10 في السائل الدماغي الشوكي.

الاستنتاجات:

يخلص المؤلفون إلى أن جرعة واحدة داخل القراب من خلايا BM-MSCs الذاتية كانت آمنة وجيدة التحمل خلال ستة أشهر في هذه المجموعة الصغيرة. وعن الفائدة يكتبون أنه “لا يمكن استخلاص استنتاجات قاطعة بشأن الفعالية من هذه الدراسة”. القيود التي يذكرونها هي عينة صغيرة جدًا، ومزيج من أمراض مختلفة وراثيًا، وغياب مجموعة ضبط، وقِصر المتابعة، وعدم التصحيح لتعدد المقارنات، وغياب التصوير بالرنين المغناطيسي أو أي نقطة نهاية موضوعية أخرى.

التواريخ المطبوعة في الورقة غير متسقة. تُذكر فترة جمع البيانات من سبتمبر 2021 إلى يونيو 2022، بينما الموافقة الأخلاقية مؤرخة في 2 يوليو 2022 وقيد السجل في 31 أغسطس 2022. لا تعلق الورقة على ذلك. يصرح عدة مؤلفين بانتسابهم إلى مركز خاص للطب الشخصي في دوسلدورف، ويذكرون أنه لم يقدم تمويلًا ولا دعمًا تجاريًا.

معلومات أساسية:

لا يتوقع المؤلفون أن تصبح الخلايا المحقونة خلايا بركنجي جديدة. تقوم فرضيتهم على آثار نظيرة صماوية: تطلق الخلايا الجذعية الوسيطة عوامل نمو مثل BDNF وGDNF وVEGF وتهدّئ الخلايا الدبقية الصغيرة المنشطة، وقد يحمي ذلك الخلايا العصبية الباقية من ضغوط تشترك فيها الترنحات الوراثية (فشل الميتوكوندريا، والإجهاد التأكسدي، والالتهاب الثانوي).

ويثيرون أيضًا مسألة مصدر الخلايا. فالخلايا الجذعية الوسيطة الخاصة بالمريض تحمل العيب الوراثي نفسه، وتتراجع جودة الخلايا الجذعية الوسيطة مع تقدم عمر المتبرع. ويقترحون للدراسات المستقبلية أن الخلايا الخيفية من متبرعين شباب أصحاء، مثل الخلايا الجذعية الوسيطة من هلام وارتون في الحبل السري، قد توفر فاعلية أكثر اتساقًا. لم تختبر هذه التجربة ذلك.