سلامة وتحمّل الخلايا الجذعية الوسيطة المشتقة من هلام وارتون لدى مرضى الحثل العضلي الدوشيني: دراسة سريرية من المرحلة 1

النقاط الرئيسة والنتائج:

من بين الدراسات المنشورة، تعدّ هذه التجربة الكورية الصغيرة الأقرب إلى نوع الخلايا المستخدمة في عيادتنا. أُعطيت خلايا جذعية وسيطة من الحبل السري (هلام وارتون) من متبرع عن طريق الوريد لأولاد مصابين بالحثل العضلي الدوشيني (DMD). كانت الدراسة تجربة منظَّمة من المرحلة 1، وافقت عليها وزارة سلامة الغذاء والدواء الكورية وأُجريت في مركز سامسونج الطبي في سيول.

سُجّل ستة أولاد، أُعطي كل منهم تسريبة واحدة، وجرت متابعتهم لمدة 12 أسبوعًا. لم تحدث أحداث سلبية خطيرة ولا سمّية محددة للجرعة. أظهرت الاختبارات الوظيفية بعد 12 أسبوعًا عدم وجود تغير ذي دلالة، وانخفضت في المتوسط القدرة على المشي ودرجات الحركة. ويذكر المؤلفون أن النتائج لم تكن كافية لإثبات الفعالية. لم تكن هناك مجموعة ضبط.

الهدف:

تحديد سلامة EN001 وتحمّله وجرعته، وهو منتج من خلايا جذعية وسيطة مشتقة من هلام وارتون، من متبرع (خيفي) ومن مرور مبكر في الاستنبات، لدى الأطفال المصابين بـ DMD. كانت الفعالية استكشافية فقط.

الطرق:

استخدمت التجربة تصميم تصعيد الجرعة المفتوح (“3+3”). تلقى ثلاثة أولاد الجرعة المنخفضة، وفحصت لجنة مراجعة السلامة بياناتهم قبل أن يتلقى ثلاثة آخرون الجرعة العالية. عُرّفت السمّية المحددة للجرعة بأنها أي حدث سلبي من الدرجة 3 أو أعلى خلال أسبوعين من التسريب.

جرى فحص سبعة أولاد وسُجّل ستة من يناير إلى أكتوبر 2022. معايير الإدراج:

• ذكر، بعمر من 2 إلى 18 سنة
• طفرة DMD مؤكدة وعلامات سريرية لـ DMD (ضعف قريب، ومشية متهادية، وعلامة غاورز)
• على جرعة ثابتة من الكورتيكوستيرويدات الجهازية يُتوقع أن تبقى كما هي طوال الدراسة

استُبعد الأولاد عند وجود كسر قذف في البطين الأيسر أقل من 50% في تخطيط صدى القلب، أو الحاجة إلى مساعدة تنفسية أو تهوية عبر فغر القصبة، أو العلاج الجيني أو أتالورين خلال الأسابيع الـ 24 السابقة، أو وجود فحوص دم أولية غير طبيعية ذات دلالة سريرية.

تراوحت أعمار المشاركين من 10.0 إلى 15.8 سنة، وكانوا جميعًا ما زالوا يمشون، مع مسافات مشي ست دقائق عند البداية من 231 إلى 346 مترًا ودرجات North Star Ambulatory Assessment (NSAA) من 8 إلى 28 من 34. كان خمسة منهم على ديفلازاكورت وواحد على بريدنيزولون.

استُنبتت دفعة واحدة من الخلايا من حبل سري واحد متبرَّع به عبر ثلاثة مرورات (نحو 20 يومًا) في وسط يحتوي على 10% من مصل العجل الجنيني، ثم جُمّدت في النيتروجين السائل بمعدل 5 ملايين خلية في كل كيس سعته 10 مل. شملت اختبارات الإفراج العقامة، والميكوبلازما، والذيفان الداخلي، وعدّ الخلايا، والحيوية، والواسمات السطحية (إيجابية لـ CD44 وCD73 وCD90 وCD105 وCD166 وسلبية لـ CD11b وCD14 وCD19 وCD34 وCD45 وHLA-DR).

كانت الجرعة المنخفضة 500,000 خلية لكل كغ. وكانت الجرعة العالية 2.5 مليون خلية لكل كغ، وهي الجرعة التي نجحت في فأر mdx. عمليًا، تلقى الأولاد في المجموعة عالية الجرعة من 140 إلى 201 مل من معلق الخلايا.

أُذيبت الأكياس في حمام مائي عند 37°C وسُرّبت وريديًا خلال 10 دقائق. كانت المعالجة المسبقة وفق تقدير الباحث وتألفت من هيدروكورتيزون 1 إلى 2 ملغ/كغ، ولورازيبام 0.1 ملغ/كغ، وأوندانسيترون، وكلورفينيرامين. رُصدت العلامات الحيوية وتشبع الأكسجين وتخطيط القلب طوال الوقت.

سُجّلت الأحداث السلبية وكيناز الكرياتين (CK) في المصل في كل من سبع زيارات. أُجريت قياسات التنفس، وقوة باسطات الركبة وعاطفات المرفق بمقياس القوة، وNSAA، واختبار المشي ست دقائق عند البداية وفي الأسبوع 12. توجد في الملحق بيانات مرحلية حتى الأسبوع 36. ومخطط لمتابعة تصل إلى 5 سنوات.

النتائج:

السلامة: حدث 18 حدثًا سلبيًا خلال 12 أسبوعًا، 6 في مجموعة الجرعة المنخفضة و12 في مجموعة الجرعة العالية. أصيب كل ولد بحدث واحد على الأقل. كانت كلها من الدرجة 1 ولم يكن أي منها خطيرًا.

• حدث احمرار وألم وتورم في موضع التسريب لدى 2 من 3 أولاد في مجموعة الجرعة العالية ولدى لا أحد في مجموعة الجرعة المنخفضة. وزالت خلال يوم.
• صداع لدى 3 أولاد (1 جرعة منخفضة، 2 جرعة عالية). وانزعج ولد واحد من رائحة المنتج لنحو يوم.
• أما الأحداث الأخرى فكانت عسر هضم، وألم في الصدر وإيلام (ولد واحد لكل منها، جرعة منخفضة)، وألم في العظام (ولد واحد، جرعة عالية)، وعدوى SARS-CoV-2 لدى ولدين ونزلة برد لدى ولدين.
• لم تحدث حمى ولا تغير في ضغط الدم ولا طفح جلدي ولا صعوبة في التنفس ولا صدمة خلال أي تسريب.
• ظهرت ثلاثة أحداث أخرى من الدرجة 1 بحلول الأسبوع 36 (21 في المجموع). لم يُنسب أي حدث متأخر إلى الخلايا.
• كانت تخطيطات صدى القلب لدى أربعة أولاد بعد 6 إلى 12 شهرًا طبيعية.

الوظيفة الحركية: انخفض متوسط درجة NSAA بمقدار 3.33 نقطة في مجموعة الجرعة المنخفضة وبمقدار 3.00 نقاط في مجموعة الجرعة العالية خلال 12 أسبوعًا. وكانت الدرجات الفردية من 18 إلى 15، ومن 25 إلى 17، ومن 18 إلى 19، ومن 8 إلى 5، ومن 28 إلى 22، ومن 14 إلى 14. كسب ولد واحد نقطة، وبقي واحد على حاله، وتراجع أربعة، أحدهم بمقدار 8 نقاط.

انخفضت مسافة المشي ست دقائق بمتوسط 13.8 مترًا (جرعة منخفضة) و47.4 مترًا (جرعة عالية). مشى ولد واحد من ستة مسافة أبعد مما كان عند البداية.

انخفضت قوة باسطات الركبة بمقدار 0.70 رطل في مجموعة الجرعة المنخفضة وارتفعت بمقدار 0.88 رطل في مجموعة الجرعة العالية. شهد أربعة من ستة أولاد بعض الزيادة. وانخفضت قوة عاطفات المرفق انخفاضًا طفيفًا حتى الأسبوع 36.

التنفس: ارتفعت السعة الحيوية القسرية كنسبة مئوية من المتوقع بمقدار 6.67% (جرعة منخفضة) و1.00% (جرعة عالية)، ولم يكن أي منهما ذا دلالة إحصائية. لم يتمكن ولد واحد من إجراء اختبار الأسبوع 12 بسبب ألم في العظام. ولم تتغير ضغوط الشهيق والزفير.

CK: مالت المستويات إلى الانخفاض حتى الأسبوع 12، دون دلالة إحصائية، وعادت إلى مستواها الأساسي بعد ذلك لدى جميع الأولاد. وارتفع CK ارتفاعًا حادًا لدى بعض الأولاد أثناء إصابتهم بكوفيد-19. ويذكر المؤلفون أنهم لم يستطيعوا القول هل كان الانخفاض أثرًا للعلاج أم تقلبًا طبيعيًا.

الاستنتاجات:

يستنتج المؤلفون أن جرعة وريدية واحدة من هذه الخلايا كانت آمنة وجيدة التحمل لدى ستة أولاد مصابين بـ DMD، وأن الفعالية لا يمكن إثباتها إلا بتجارب عشوائية أكبر بجرعات متكررة. وقد سجّلوا تجربة من المرحلتين 1/2 متعددة المراكز، عشوائية، مزدوجة التعمية، مضبوطة بالغفل (NCT06328725).

القيود التي يذكرونها هي جرعة واحدة، وعينة صغيرة جدًا، ومتابعة لمدة 12 أسبوعًا بينما تمتد معظم تجارب DMD من سنة إلى سنتين، وعدوى كوفيد-19 التي شوّشت القياسات. إضافة إلى ذلك، لم تكن هناك مجموعة ضبط، ومن المتوقع أن يتراجع الأولاد بعمر 10 إلى 15 سنة على أي حال، ولذلك لا تستطيع النتائج الوظيفية أن تبيّن هل أحدثت الخلايا فرقًا في أي من الاتجاهين.

معلومات أساسية:

لا يزعم المؤلفون أن الخلايا تتحول إلى عضلة. بناءً على عملهم على الفئران، يقترحون أن الخلايا تفرز عوامل واقية: XCL1 (ليمفوتاكتين)، الذي يفيدون بأنه يحمي الخلايا العضلية من الموت المبرمج، وMMP-1، الذي يفيدون بأنه يقلل تندب العضلات. ويرون أن الخلايا في المرور 3 أقوى فعالية وأقل عرضة للشيخوخة في الاستنبات من الخلايا ذات المرورات المتأخرة المستخدمة في كثير من المنتجات، ولهذا فجرعتهم أقل منها في تجارب أخرى للخلايا الجذعية الوسيطة.

يشير المؤلفون إلى أن الحمى العابرة هي أكثر الآثار الجانبية شيوعًا لتسريب الخلايا، وينسبونها جزئيًا إلى السائل الحامل. استخدموا تركيبتهم الخاصة الخالية من المكوّنات الحيوانية المنشأ ولم يسجلوا حمى لدى الأولاد الستة. ومع هذا العدد القليل من المشاركين، لا يمكن استخلاص أي استنتاج من هذه الملاحظة.

زوّدت شركة ENCell Co., Ltd.، مطوِّرة المنتج، بالخلايا. وتذكر الورقة أن الجهة الراعية لم يكن لها دور في تفسير البيانات أو كتابة التقرير، وأن المؤلفين أعلنوا عدم وجود تضارب في المصالح. جاء التمويل من منح حكومية كورية للبحث الصحي ومن مركز سامسونج الطبي.